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產(chǎn)品中心

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解沒食子酸鏈球菌PCR檢測試劑盒廠家

產(chǎn)品簡介

解沒食子酸鏈球菌PCR檢測試劑盒廠家
上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
S100A9檢測試劑盒不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

更新時間:2021-03-13
訪問次數(shù):604
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組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

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 產(chǎn)品名稱

 解沒食子酸鏈球菌PCR檢測試劑盒廠家

 英文名稱

 Streptococcus gallolyticusPCR

 貨號

 LZP7334

實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設(shè)立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
Wilfortrine釩粉 99.9% metals basis,100-200 mesh新綠原酸 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%

Xanthatin質(zhì)釩標(biāo)樣 995 - 1005 ug/ml V(3+) 的 2% H3溶液 (20°C)新綠原酸 99%

Xanthinin五二釩 99.99% metals basis()橄欖苦苷  分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%(HPLC)

Zederone氧化釔 SP番瀉苷C 99%

Zedoarofuran硝酸氧鋯 合物 SP亞麻木酚素 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%

Zedoarondiol硝酸氧鋯 合物 99.99% metals basis雷公藤乙素  分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%

3,5,9-Trihydroxyergosta-7,22-dien-6-one氧化鋅 SP牡荊素鼠李糖苷  分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%

3,5-Cycloergosta-6,8(14),22-triene鋅粉 SP牡荊素鼠李糖苷  98%

3,5-Dihydroxyergosta-7,22-dien-6-one鋅粒 SP雷公藤內(nèi)酯甲  分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%

3,7,16-Trihydroxystigmast-5-ene硫代乙酸 98%雷公藤內(nèi)酯甲  98%

3-beta-Hydroxyergost-5-en-7-one硫代乙酸 95%燦爛甲酚藍 試劑級

3beta-Hydroxyporiferast-5-en-7-one氨芐青霉素,三 分析標(biāo)準(zhǔn)品羥基萘酚藍 IND,94%(HPLC)

4-Beta-Hydroxycholesterol苯甲 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.9% (GC)羥基萘酚藍二鈉鹽 ACS

5,8-Epidioxyergosta-6,9(11),22-trien-3-ol硫酸安普霉素 分析標(biāo)準(zhǔn)品異胺 >99.0%(GC)

6,7-Dihydroneridiene A甲草胺 分析標(biāo)準(zhǔn)品,95.5%二異胺 98%

6beta-Hydroxystigmast-4-en-3-one氟菊酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品N-甲基二乙胺 98%

氘代苯-D6(0.5ml x 10 )Ribosomal Protein L7a (E109) Antibodyphospho-CREB-1(Ser133)  磷酸化CREB-1抗體

氘代苯-D6(0.55ml x 10)Phospho-β-Arrestin 1 (Ser412) (6-24) Mouse mAbphospho-CREB-1(Ser129)  磷酸化CREB-1抗體

氘代苯-D6(10g )Phospho-PDGF Receptor α (Tyr762) (D9B1N) Rabbit mAbphospho-CREB-1(Ser121)  磷酸化CREB-1抗體

氘代苯-D6(10g )Lamin B2 (E1S1Q) Rabbit mAb (HRP Conjugate)phospho-c-Raf(Tyr341)  磷酸化原癌基因c-Raf抗體

氘代苯-D6(25g)tch2 (8A1) Rabbit mAbphospho-c-Raf(Thr269)  磷酸化原癌基因c-Raf抗體

氘代苯-D6(50g)tch4 (L5C5) Mouse mAbphospho-c-Raf(Ser494)  磷酸化原癌基因c-Raf抗體

氘代苯-D6(100g )eIF4A (F52) Antibodyphospho-c-Raf(Ser471)  磷酸化原癌基因c-Raf抗體

氘氧化鈉-d(10g )CD3 (17A2) Rat mAb (APC Conjugate)phospho-c-Raf(Ser462)  磷酸化原癌基因c-Raf抗體

氘氧化鈉-d(50g )PHB1 Antibodyphospho-c-Raf(Ser43)  磷酸化原癌基因c-Raf抗體

氘代三(0.50 mL x 10 )PHB1 Antibodyphospho-c-Raf(Ser339)  磷酸化原癌基因c-Raf抗體
解沒食子酸鏈球菌PCR檢測試劑盒廠家豬促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

豬促生長激素釋放激素(GHRH)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

豬促胃液素受體(GsaR)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

豬單核細胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT5克

豬膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT25克

豬低分子肝素(LMWH)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1克

豬低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:250克

豬地塞米松(Dex)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT50克

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