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綿羊皰疹病毒通用PCR檢測試劑盒規(guī)格

產品簡介

綿羊皰疹病毒通用PCR檢測試劑盒規(guī)格
上海聯祖生物相關產品:
MMP11檢測試劑盒蛋白質研究:蛋白電泳、蛋白提取、蛋白純化、蛋白定量、組織/蛋白染色

更新時間:2021-03-13
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組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

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 產品名稱

 綿羊皰疹病毒通用PCR檢測試劑盒規(guī)格

 英文名稱

 Ovine Herpesvirus(OHV)PCR

 貨號

 LZP7100

實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
5′-CDP,2Na三(基)伍甲基環(huán)戊二烯基釕(II)六氟磷酸 96%α-己基肉桂 ≥95%,Kosher

5′-CTP,2Na聚乙烯 18-88 Mw ~130,000柳酸己酯 98%

5′-CTP,3Na聚乙烯 20-98 Mw ~125,000酸異戊酯 98%

5′-CTP,4Na聚乙烯 4-98 Mw ~27,000酸異戊酯 ≥98%, FCC

Thymine五氯 99%,用于植物細胞培養(yǎng)己酸異戊酯  98%

Uracil五氯標準溶液 0.1mg/ml2-異基-4-甲基噻唑 98%

Uridine五氯 分析標準品,99%異戊 98%

U 5′-P五氯標準溶液 100μg/ml,u=2%吲哚 99%

5′-UMP,2Na五氯標準溶液 10μg/ml,u=2%吲哚 ≥99%, FCC, Kosher

5′-UDP五氯 97%異丁酯 99%

5′-UDP,2Na硫酸奎尼丁 USP級異丁香酚(正+反) 97%

5′-UTP,3Na2-喹喔啉羧酸 97%乙?;惗∠惴?≥98%, FCC

5′-UTP,4Na羅丹明B 高純級,≥95.0%(HPLC)乙酸異龍腦酯 90%

UDPGA樹脂天青 90%乙位紫羅蘭酮 97%

UDPG羅丹明6G AR異甲基紫羅蘭酮70 60-70%

Guasine樹脂天青 for cell culture,≥90% (HPLC)甲酸異戊酯  93%

鹽酸恩諾沙星(標準品)PhosphoPlus® HSP27 (Ser82) Antibody DuetSATB1  核基質結合區(qū)結合蛋白1抗體

佐米曲普坦WIP1 (D4F7) Rabbit mAbSASS6  紡錘體組裝異常蛋白6抗體

胸腺肽alpha 1IRF-3 (D6I4C) XP® Rabbit mAbSASH1  腫瘤抑制基因PEPE1抗體

替加氟IRF-3 (D6I4C) XP® Rabbit mAbSART3  T淋巴細胞識別的鱗狀細胞癌SART3抗體

替加氟(標準品)SignalSilence® MDR1/ABCB1 siRNA IISART1  T淋巴細胞識別的鱗狀細胞癌抗原抗體

阿昔莫司,阿西莫司PAI-1 (D9C4) Rabbit mAbSARS S-protein  抗表面S蛋白抗體

阿昔莫司,阿西莫司(標準品)MDH2 (D8Q5S) Rabbit mAbSARS putative orflab polyprotein  抗體

阿達帕林Phospho-cdc25C (Ser216) Blocking PeptideSARM1  SARM1蛋白抗體

阿達帕林(標準品)EWS AntibodySarcomeric Alpha Actinin/ACTN2  α橫紋肌輔肌動蛋白/α-SCA抗體

阿德福韋NFI-C AntibodySAPK3/MAPK12  應激活化蛋白激酶3抗體(絲裂原活化蛋白激酶12)
綿羊皰疹病毒通用PCR檢測試劑盒規(guī)格人巨噬細胞移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

人聚集蛋白(Agrin)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:500克

人卷曲蛋白8(FZD8)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:25毫克

人軍團菌抗體IgA(LPAb-IgA)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

人軍團菌抗體IgG(LPAb-IgG)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:保存:-20℃100毫克

人軍團菌抗體IgM(LPAb-IgM)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:25片

人軍團菌抗原(LPAg)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:150米

人抗BB抗體(BB-Ab)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT25克

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