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新生隱球菌PCR檢測試劑盒價格

產(chǎn)品簡介

新生隱球菌PCR檢測試劑盒價格
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更新時間:2021-03-14
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組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。

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 產(chǎn)品名稱

 新生隱球菌PCR檢測試劑盒價格

 英文名稱

 Cryptococcus neoformansPCR

 貨號

 LZP6625

實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
地榆皂苷I35286-58-9 實驗步驟Anti-USP16 Antibody研究領域  細胞生物 信號轉(zhuǎn)導 轉(zhuǎn)運蛋白

槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龍膽雙糖苷*Anti-USP44 Antibody研究領域  細胞生物 信號轉(zhuǎn)導 轉(zhuǎn)運蛋白

槐定堿6882-68-4實驗方法Anti-USP21 Antibody研究領域  細胞生物 信號轉(zhuǎn)導 轉(zhuǎn)運蛋白 泛素

環(huán)黃芪醇84605-18-5 *Anti-VAMP7 Antibody研究領域  細胞生物 信號轉(zhuǎn)導 轉(zhuǎn)運蛋白

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金雞納堿130-95-0 *Anti-VAPB Antibody研究領域  細胞生物 信號轉(zhuǎn)導 轉(zhuǎn)運蛋白 表觀遺傳學

金絲桃苷482-36-0實驗步驟Anti-VAPB Antibody研究領域  細胞生物 表觀遺傳學

款冬酮104012-37-5價格Anti-VASP Antibody研究領域  細胞生物 表觀遺傳學

連翹甙487-41-2實驗步驟Anti-VCAM1 Antibody研究領域  細胞生物 信號轉(zhuǎn)導 G蛋白偶聯(lián)受體 G蛋白信號

毛冬青皂苷B2 實驗方法Anti-VCAM1 Antibody研究領域  細胞生物 結(jié)合蛋白 表觀遺傳學

毛冬青皂甙B3 實驗步驟Anti-USP7 Antibody研究領域  腫瘤 細胞生物 信號轉(zhuǎn)導 表觀遺傳學 泛素

木蝴蝶苷B114482-86-9實驗步驟Anti-VCAN Antibody(原貨號PB0480)研究領域  細胞生物 信號轉(zhuǎn)導 轉(zhuǎn)運蛋白

芹菜苷26544-34-3 ?*Anti-VCAM1 Antibody研究領域  細胞生物 信號轉(zhuǎn)導 轉(zhuǎn)運蛋白 G蛋白偶聯(lián)受體 G蛋白信號

人參皂苷Rb1 41753-43-9實驗方法Anti-VCL Antibody研究領域  腫瘤 細胞生物 信號轉(zhuǎn)導 細胞粘附分子 細胞分化 細胞骨架

人參皂苷Rc 11021-14-0 *Anti-VCL Antibody研究領域  細胞生物 信號轉(zhuǎn)導 細胞骨架

2,5-二溴-6-甲基  噁唑  5-基-2-巰基苯并咪唑

非諾洛芬鈣二合物  5-基吲唑  3-基-5-巰基-1,2,4-三唑

2-溴-4-基噻唑  嗎啉  2-基-6-甲氧基苯并噻唑

4--3-苯甲醚  2,9-二甲基-1,10-鄰洛啉  2,3,5,6-四-7,7',8,8'-四二甲基對苯醌

3-Chloropropyne  3-  624-65-7

D-(+)-Cellobiose  D-纖維二糖  528-50-7

Cyclopropyl acetylene  環(huán)丙乙炔  6746-94-7

STACHYOSE TETRAHYDRATE  蘇四糖  10094-58-3

大鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒 ,英文名: FFA ELISA Kit

人抗單核細胞抗體(AMA)ELISA檢測試劑盒Humanai-Mocyteaibody,AMAELISAKit 96T/48T

大鼠白介素1受體樣1(IL1RL1)免疫試劑盒 Rat IL-1 Receptor Like 1,IL1RL1 ELISA Kit

CLIAKitfoE(Humaelomerase)ELISAKit人端粒酶規(guī)格:48T/96T

人體ERβ基因甲基化檢測試劑盒20次

ELISAKitTPO-Ab人抗甲狀腺過氧化物酶抗體規(guī)格:48T/96T
新生隱球菌PCR檢測試劑盒價格自解酶結(jié)構域5蛋白抗體Berberrubine中文名:小檗紅堿別名:分子式:C19H16Cl4

酰基輔酶A硫酯酶8Theophylline中文名:茶堿別名:分子式:C7H8N4O2

載脂蛋白A5抗體Brucine中文名:別名:分子式:C23H26N2O4

溶血磷脂酸?;D(zhuǎn)移酶D抗體Preskimmianine中文名:前茵芋堿別名:分子式:C17H214

載脂蛋白E3抗體10-Hydroxycamptothecin中文名:10-羥基喜樹堿別名:分子式:C20H16N2O5

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